E1A激活基因阻遏子促进人血管平滑肌细胞分化和迁移
作者:韩雅玲 出处:中国人民解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所
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目的：E1A激活基因阻遏子（cellular repressor of E1A stimulated genes,CREG）是新近从Hela细胞cDNA文库中克隆的转录调控相关基因。研究表明，CREG蛋白与6-磷酸甘露醇胰岛素样生长因子Ⅱ受体（insulin like growth factorⅡ/mannose 6 phosphate receptor,M6P/IGF2R)相关，在多种肿瘤细胞中发挥抑制增殖和促进分化的作用。先前报道本室建立的人胸廓内动脉平滑肌细胞克隆株HITASY在不同培养条件下可发生分化和去分化表型的相互逆转，应用差异显示PCR技术在分化表型HITASY中可筛选到高表达差异性CREG基因，提示其表达可能与血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）的分化密切相关，但该基因的表达变化对VSMCs迁移功能有无影响国内外尚未见报道。目前认为VSMCs增殖与迁移是导致动脉粥样硬化和血运重建后再狭窄等增生性血管病的重要机制，而血管损伤后VSMCs表型转换是其增殖和迁移的始动因素。为探讨CREG蛋白在人血管平滑肌细胞株HITASY分化和迁移中的调控作用，进行以下实验。 方法：本实验构建了携带正、反义CREG基因的重组逆转录病毒载体pLNCX-2（）/CREG和pLXSN（-）/CREG。以带绿色荧光蛋白（greenfluorescent protein,GFP）的空载体pLNCX（）/GFP和正常HITASY为对照，用磷酸钙共沉淀法将重组逆转录病毒载体转染293细胞，包装出完整的逆转录病毒后，感染HITASY。经G418筛选，获得稳定感染的细胞克隆。应用免疫荧
发布人:onetwofree 发布时间:2005年9月23日
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