溶血磷脂酸对小鼠胚胎干细胞分化心肌细胞钙通道电流的影响
作者:罗浩 出处:武汉大学人民医院
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目的：诱导小鼠胚胎干细胞（ES-D3）向心肌细胞分化并观察溶血磷脂酸(LPA)对分化心肌细胞L型钙通道电流的影响。 方法：①通过小鼠胚胎成纤维细胞饲养层培养小鼠胚胎干细胞并进行扩增。②采用悬滴、悬浮、贴壁培养诱导胚胎干细胞向心肌细胞分化。③分化的心肌细胞鉴定：动作电位的测定；免疫荧光方法检测心肌细胞特异性标志物cTnT、α-actinin；心肌细胞特异性标志物mRNA的提取和PT-PCR。④酶解消化获取单个分化心肌细胞。⑤全细胞膜片钳方式记录0.1、1.0和10.0 μmol/L溶血磷脂酸对小鼠胚胎干细胞分化心肌细胞L型钙通道电流的影响。 结果：小鼠胚胎干细胞成功向心肌细胞分化;0.1、1.0和10.0 μmol/L溶血磷脂酸使小鼠胚胎干细胞分化心肌细胞L型钙通道峰电流密度（pA/pF）由对照组-4.4±0.3增加到-5.7±0.4（P<0.05）、-7.2±0.6（P<0.05）、-9.8±0.9（P<0.01）。 结论: 溶血磷脂酸呈浓度依赖性促进小鼠胚胎干细胞分化的心肌细胞L型钙通道电流。
发布人:onetwofree 发布时间:2005年9月23日
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