大鼠骨髓间充质干细胞条件培养液促进心肌成纤维细胞分泌胶原
作者:韩瑜 出处:北京市，中国医学科学院
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目的：缺血性心血管疾病已成为威胁人类健康的重大疾病之一。骨髓间充质干细胞(MSCs)移植因其可以有效地改善心脏功能，干预心室重构病理过程而成为治疗心肌缺血的新的希望。但目前，MSCs移植改善心功能的确切机制尚不清晰，移植细胞的旁分泌作用是细胞心肌成型术(Cellular Cardiomyoplasty，CCM)可能的作用方式之一。氧、营养因子和生长因子的缺乏是缺血心肌组织微环境的组成因素，本研究旨在探讨MSCs经缺氧和无血清刺激后所分泌的物质对心肌成纤维细胞(FBCs)胶原合成的影响，以此为MSCs移植和治疗提供一定的理论依据。 方法：MSCs分离自80克重的SD大鼠的股骨骨髓，并用含10%胎牛血清的IMDM培养液在37℃培养细胞。通过撤去培养液中的胎牛血清，以及缺氧处理模拟体内的缺血环境。分别于缺氧和无血清培养处理3小时，6小时，9小时，24小时后收集MSCs条件培养液。FBCs与MSCs条件培养液孵育40小时后，用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)，检测FBCs细胞的增殖；通过3H-脯氨酸掺入试验(3H-proline incorporation)检测FBCs细胞胶原蛋白的合成；以半定量RT-PCR方法分析Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA水平的表达。实验以无血清培养液培养的FBCs作为对照组。 结果：①MTT：与对照组比较加入缺氧和无血清处理3小时、6小时、9小时、24小时的MSCs条件培养液培养的FBCs，各组间OD570的值无显著差别，提示MSCs条件培养液没有影响FBCs的增殖。②3H-
发布人:onetwofree 发布时间:2005年9月23日
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