目的 研究香菇多糖(LNT)对糖尿病大鼠巨噬细胞脂质过氧化作用 和一氧化氮水平的影响。
方法 雄性SD大鼠29只随机分成三组:①对照组10只;②糖尿病组1 0只;③LNT治疗组9只。后二组大鼠在禁食12h后按60mg/kg腹腔注射链脲佐菌素,注射后72h测血糖,≥13 . 8mmol/L为模型成功,此后,LNT治疗组按4mg/kg.d剂量腹腔注射LNT,对照组及糖尿病组腹腔注射等体积生理盐水,每天一次,连续一个月。分别取上述三组大鼠,股动脉放血处死大鼠,无菌室内,常规消毒后原位灌洗AM,每次从气管内注入生理盐水6ml,重复4次,每次灌洗液混匀后离心,2000r/min,15min,弃上清液后用Hank’s液再次离心洗涤,弃上清液后沉淀之细胞团用含10%小牛血清的RPMI-1640培养液调节AM浓度至2×106/ml,以每瓶1ml分装至培养瓶内,置37℃培养箱内培养。上述股动脉放血处死的大鼠,无菌室内常规消毒后,每只 大鼠腹腔注入灭菌生理盐水20ml,轻轻按揉腹部 3min,抽回腹腔液约15ml,余处理同肺泡巨噬细胞(AM)的灌洗,取上述经37℃贴壁培养2h的PM与AM,弃上清液及非贴壁细胞,用37 ℃生理盐水轻轻洗涤一次后每瓶加入1ml三蒸水,置低温水箱内-15℃、+15℃反复冻融5次,每次30min,制成破碎的巨噬细胞悬液,存待测。SOD活性用黄嘌呤氧化酶法、GSH-P X活性用化学比色法、MDA含量用硫代巴比妥酸法、NOS活性用化学比色法测定,NO 含量用硝酸还原酶法测定NO-2/NO-3含量来代表。以考马斯亮蓝法测定蛋白含量。数据以x±s表示,组间比较用t检验。
结果
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