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KKay小鼠糖尿病肾病时MMP-9表达及其细胞内信号传导机制的探讨

作者:郭清华 出处:解放军总医院

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目的 观察Kkay小鼠糖尿病肾病时基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的变化,在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)内探讨糖基化终末产物(AGEs)所诱导的MMP-9高表达与核转录因子kappa -B(nuclear factor kappa-B,NF-kB)激活的关系。

方法 Kkay糖尿病小鼠(KA)和Kkay非糖尿病小鼠(KB)各8只,喂养4个月后取材。测定血糖,以PAS染色观察各组糖尿病肾病病理变化;对肾小球MMP-9表达进行免疫组化染色和半定量图像分析;并以RT-PCR检测肾脏MMP-9 mRNA表达水平。以100μg/ml AGEs以及NF-kB抑制剂PDTC作用于脐静脉内皮细胞,提取细胞 总RNA、核蛋白,分别以RT-PCR、Northern Blot和间接荧光标记流式细胞检测的方法观察M MP-9和TIMP-1表达水平;以凝胶阻滞电泳(electrophoretic mobility shift assays,EMS A)检测核转录因子NF-kB的激活情况。

结果 KA组出现明显糖尿病肾病病变,其GI明显高于C 57组(P<0.05);免疫组化显示Kkay小鼠MMP-9阳性着色面积(11.14%)高于对照组(5.6 8% )(P<0.01),MMP-9 mRNA表达水平有类似的变化。AGEs可使MMP-9蛋白和mRNA水平以及TIM P- 1mRNA表达增强;同时AGEs可激活NF-kB,PDTC抑制NF-kB活性时,AGEs所诱导的MMP-9及TIMP -1表达降低。

结论 Kkay小鼠出现糖尿病肾病时伴有MMP-9表达水平

发布人:onetwofree 发布时间:2005年3月11日
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