目的 比较ACEI干预与非ACEI干预的两组糖尿病肾病大鼠间肾脏组织基因表达的差异,探讨ACEI对糖尿病肾病的保护机制。
方法 (1)雄性SD大鼠6只,用链脲佐菌素(STZ,50mg/kg)诱导构建1型糖尿病大鼠模型 ,继续喂养至出现糖尿病肾病,6只大鼠分为两组各3只,其中一组以ACEI干预治疗(开博通 );(2)从肾脏组织抽提总RNA,逆转录为cDNA,分别用Cy5-UTP和Cy3-dUTP对实验组与正 常组cDNA探针进行荧光标记,探针与基因表达谱芯片杂交,结果由扫描仪扫描并用软件进行 分析统计。判定基因差异表达的指标:Cy5/Cy3比值>2或<0.5;Cy3或Cy5荧光信号强度> 800。
结果 在两组大鼠肾脏组织中有显著差异表达的基因共180个,其中EST(表达识别序列)28个 ,表达上调的基因有79个,表达下调的基因有101个。已知功能的基因中:(1)能量代谢相关基因表达改变;(2)免疫粘附相关基因表达上调;(3)细胞骨架相关基因表达下调;(4) 糖尿病慢性并发症相关基因表达改变;(5)细胞增殖相关基因表达下调;(6)氧化应激相关基因表达上调;(7)细胞内信号传导相关基因表达改变。
结论 糖尿病肾病大鼠中,ACEI可能通过能量代谢、免疫、氧化应激、细胞增殖等方面的调节而发挥肾脏保护作用,同时也间接说明糖尿病肾病的发生发展可能与上述等方面的异常有关。对于功能未知的基因,我们正用电子克隆技术克隆全长cDNA,分析其与糖尿病肾病及ACEI肾脏保护机制。
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