目的 通过研究resistin对C2C12肌细胞和3T3-L1脂肪细胞葡萄糖代谢的影响， 以探讨resi stin在外周组织IR发生机制中的作用。
方法 用RT-PCR技术从小鼠脂肪组织扩增resistin 基因cDNA，A/T克隆于pGEM-T载体，再亚克隆于仅多克隆酶切位点方向相反的一对真核表达 质粒pcDNA3.1(+)和PcDNA3.1(-)，核苷酸序列分析构建载有resistin基因的重组真核表达 质 粒pcDNA3.1(+)-resistin和载有resistin基因反义核酸重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)-re si stin(-)。通过脂质体将PCDNA3.1+-resistin转染小鼠C2C12肌细胞，以使肌细胞表达resis tin，pcDNA3.1(-)-resistin(-)转染小鼠3T3-L1脂肪细胞，以使脂肪细胞表达resistin基 因 的反义核酸，通过G418筛选稳定表达的细胞株。对非转染的细胞组（对照组）、瞬时转染重组真核表达质粒的细胞组（瞬时组）、瞬时转染真核表达载体的细胞组（载体组）和稳定转染重组真核表达质粒的细胞组（稳定组）进行葡萄糖代谢的检测。用3H-2-脱氧葡萄糖进行C 2C12肌细胞和3T3-L1脂肪细胞葡萄糖摄取试验，用D-〔14C（U）〕葡萄糖进行C2C12肌细胞葡萄糖氧化和糖原合成试验。通过方差分析比较细胞组间葡萄糖代谢的差异。
结果 1.核苷酸序列分析结果显示：pcDNA3.1（+）-resistin：插入的DNA片段的核苷酸序列与小鼠resist in 基因 mRNA编码区序列完全一致，且方向正确；pcDNA3.
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