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肥胖症动脉血管差异表达蛋白之初步分析

作者:陈述林 出处:上海市内分泌研究所

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  目的:应用蛋白质双向电泳关技术和质谱分析技术,初步建立肥胖症动脉血管差异表达蛋白质谱。  方法:在外科手术过程中采集手术切割下来的器官动脉,去除周围组织后快速浸入液氮中,然后放入冻存管中置‐80℃下保存,上述工作在器官离体后1小时内完成。诊断标准和分组:肥胖症:BMI≥30。高血压:根据1999年世界卫生组织高血压专家组(WHO/ISH)确定的标准和中国高血压防治指南(1999年10月)的规定,即:收缩压≥140mmHg或舒张压≥90mmHg,或正在接受降压药物治疗者。.糖尿病:根据ADA(1997年)新建议确立的血糖值,即:空腹血糖≥7.0mmol/L,或随机血糖≥11.1mmol/L,或OGTT2h血糖≥11.1mmol/L。血脂异常:有一项以上脂质代谢指标异常。根据年龄、性别和血管来源匹配情况,将病例分成如下四组:对照组(血生化指标和心电图正常)、2型糖尿病组和单纯性肥胖组(肥胖、高血压、血脂异常)。采用pH5-8预制胶条(pH5-8ReadyIPG strips)等电聚焦,用12%SDS-PAGE 垂直电泳进行第二向分离。用盐柱除盐之后,蛋白质溶液上样量是1800μg(450μl),经PDQUEST软件分析,将灰度差异达两倍以上的蛋白点割胶、胰酶溶解后进行蛋白质质谱分析。  结果:上样量为1800μg(450μl)时每个胶显示2800-3000个蛋白点,各组之间有显著差异的点240个。在来自肥胖症、糖尿病和对照组的样品中选定20个表达差异5倍的蛋白点进行蛋白质质谱分析,16个为已知蛋白质,4个是未知蛋白质,它们是(a)铁蛋白轻链(ferritin light subunit,gi︱182516, MW16.384KD,PI 5.65,

发布人:onetwofree 发布时间:2005年2月16日
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