目的:2型糖尿病(T
2DM)常并发冠心病(CAD),为T
2DM患者的主要死亡原因。然而,其机制目前尚未完全阐明。本研究旨在探讨内皮一氧化氮合酶基因5’-侧翼区T
-786→C突变与T
2DM患者并发CAD的关系。 方法:近3年来,选择T
2DM患者186例,年龄55±14岁,男94例,女92例;65例并发CAD(伴CAD组),年龄57±11岁,男35例,女30例;121例不伴CAD,年龄54±13岁,男59例,女62例;同期选择正常人63例作为对照。eNOS基因 5’-侧翼区T
-786→C突变的检测:应用PCR扩增含T
-786→C突变位点的基因序列(236bp)。其引物序列如下:正向:5’-ATG CTC CCA CCA GGG CAT CA-3’;反向:5’-GTC CTT GAG TCT GAC ATT AGG G-3’
[3]。反应体系50μl, DNA扩增按常规方法进行。ASO探针:T
-786序列为5’-GGG TCA GCC AGC CAG GGA A-3’(检测T
-786序列);C-786序列为5’-GGG TCA GCC GGC CAG GGA A-3’(检测C
-786序列)。ASO探针杂交按我们以前报道的方法进行。用r-
32P ATP和T
4多核苷酸激酶进行5’末段探针标记,杂交及放射自显影。 结果:与对照组相比,T
2DM伴CAD